Institute細胞的使用方法介紹
發(fā)布日期:2020-08-19 點(diǎn)擊:1554
Institute細胞要要想在培養基中生長(cháng),便要創(chuàng )造細胞能夠生長(cháng)的緩沖系統。細胞較脆弱一旦暴露在不適宜的環(huán)境中便會(huì )立馬死亡。
在對培養基的環(huán)境進(jìn)行調試的時(shí)候,要做成一套緩沖系統,能夠在方方面面照顧到細胞的成長(cháng),在細胞培養基中接入碳酸氫鈉讓其與空氣中的二氧化碳平衡,設置一定量的培養液,讓細胞正常的成長(cháng)。并且在培養的過(guò)程中,不要把細胞培養基的蓋得太緊,以免造成氧氣的缺失,影響細胞的活性。
使用方法
Institute細胞是一種高度分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養且存活時(shí)間較短。取出細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態(tài)。
吸出細胞培養瓶中的培養基,添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養基終止消化。
用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;待細胞*貼壁后,培養觀(guān)察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。