teknova培養基滅菌效果下降的6大因素分析
發(fā)布日期:2022-03-28 點(diǎn)擊:934
teknova培養基是結合解剖,生物化學(xué)和免疫學(xué)方法鑒定組織切片中特異性抗原-抗體相互作用的技術(shù),以各種格式使用,但所有方法都涉及兩個(gè)步驟:樣品制備和標簽。
培養基用于基礎研究,以了解生物組織不同部位細胞標志物和差異表達蛋白質(zhì)的分布,用于異常細胞的染色,如在癌性腫瘤中,細胞增殖和細胞死亡(凋亡和壞死)的特異性標志物的染色。
樣品制備對于抗體-抗原相互作用的可視化至關(guān)重要,保持細胞形態(tài),包括下面的組織結構并且還維持靶抗原的表位的方式來(lái)制備樣品。固定用于保存組織,常見(jiàn)的試劑包括甲醛,多聚甲醛和戊二醛,它們都在不同程度上作用于蛋白質(zhì)中的可逆交聯(lián)共價(jià)鍵,但是這種固定有時(shí)會(huì )導致表位的掩蔽。因此,固定方案基于用于檢測的組織和抗體進(jìn)行實(shí)驗確定和優(yōu)化。
造成teknova培養基滅菌效果下降的6大因素分析:
影響培養基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時(shí)間外還有培養基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數量、微生物細胞含水量、微生物細胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。
1、營(yíng)養成分的保持:濕熱滅菌時(shí),微生物被殺死的同時(shí),培養基的營(yíng)養成分也遭到了一定的破壞,特別是氨基酸和維生素。如在121℃,僅20min,就有59%的賴(lài)氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,蛋氨酸也有相當數量被破壞。在熱的作用下某些營(yíng)養成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應,造成培養基中原有營(yíng)養成分的數量變化,因而影響培養基質(zhì)量。
2、微生物的耐熱性:細菌芽孢的熱阻較大,滅菌所需要的時(shí)間取決于把細菌芽孢減少到所規定數目的時(shí)間。
3、pH值:對微生物的耐熱性影響很大。
4、培養基成分:油脂、糖類(lèi)及蛋白質(zhì)等組成的高濃度有機物會(huì )包于細胞的周?chē)问揭粚颖∧?、影響熱的傳導。而高濃度的鹽類(lèi)、色素則削弱其耐熱性,滅菌較易。
5、泡沫:泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進(jìn)去,殺死其中的雜菌。
6、顆粒:顆粒小,容易滅菌,顆粒大,則難滅菌。