Megazyme試劑盒的保存方法和操作注意事項
發(fā)布日期:2021-10-24 點(diǎn)擊:1041
Megazyme試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色,顏色的深淺和樣品中的白細胞介素呈正相關(guān),用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度,計算樣品濃度。
該檢測試劑盒的主要在于直接提供高純度的酶,酶的活力是標準化的,而標準化的酶的活力在測量抗性淀粉是*的。該試劑盒提供的酶都是穩定的液體,可以保存到試劑盒有效期,并且是直接應用液,不需要使用前再溶解。
一、樣品收集、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。
3.細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5.保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二、操作注意事項
1.Megazyme試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì )有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2.實(shí)驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,結果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4.嚴格按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
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