Megazyme試劑盒的操作步驟介紹
發(fā)布日期:2021-03-22 點(diǎn)擊:1283
Megazyme試劑盒將目標抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結合的生物素抗體洗凈后,加入標記和親和素,在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色,顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān),用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度,計算樣品濃度。
該試劑盒經(jīng)過(guò)改進(jìn)后,更加快速和靈敏,靈敏度是傳統己糖激酶法的兩倍,成本低,試劑配制后可穩定保存2年, 采用試劑盒形式,包含檢測必需的所有酶,提供計算軟件,使數據處理更方便,包含標準品。原理上,將單位體積的谷物面粉提取物或發(fā)酵肉湯培養基在條件下用底物混合物孵育,通過(guò)加入弱堿性溶液終止反應并使溶液變色,測定400nm下的吸光度值,該值與樣品中α-淀粉酶的含量直接相關(guān)。
Megazyme試劑盒操作步驟
?、購氖覝仄胶?0min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
?、谠O置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
?、蹣颖究紫燃哟郎y樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
?、艹瞻卓淄?,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
?、輻壢ヒ后w,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次。